盘点：J Periodontol近期研究一览
2017-09-06 MedSci MedSci原创
【1】研究高脂饮食后小鼠牙槽骨变化和糖耐量受损的交叉作用易感个体的高脂肪饮食（HFD），体重（BW）增加和葡萄糖耐量异常与牙槽骨吸收（ABL）有关。本实验使用协同交叉（CC）小鼠种群，研究遗传背景对HFD后牙槽骨变化和葡萄糖耐量的共同作用。研究将来自19个不同CC系的78只小鼠啮齿动物食物饲养8周，随后转移到HFD（42％脂肪）中饲养12周。评估BW变化，并使用腹膜内葡萄糖耐量试验（IPGTT
【1】研究高脂饮食后小鼠牙槽骨变化和糖耐量受损的交叉作用
易感个体的高脂肪饮食（HFD），体重（BW）增加和葡萄糖耐量异常与牙槽骨吸收（ABL）有关。本实验使用协同交叉（CC）小鼠种群，研究遗传背景对HFD后牙槽骨变化和葡萄糖耐量的共同作用。
研究将来自19个不同CC系的78只小鼠啮齿动物食物饲养8周，随后转移到HFD（42％脂肪）中饲养12周。评估BW变化，并使用腹膜内葡萄糖耐量试验（IPGTT）测量葡萄糖耐量。通过多重免疫测定法定量测6个细胞因子/趋化因子，通过微电脑层析成像定量肺泡骨量，计算相对于对照组（143只小鼠维持在标准食物饮食20周）的ABL表型。
结果显示，HFD后糖耐量反应有显着的性差异（P <0.01），差异有统计学意义（P <0.01）。 CC线的牙槽骨变化明显变化（P <0.01）。总体而言，牙槽骨量变化与BW或葡萄糖耐量反应增加无显着相关性。然而，个体CC系发现2型糖尿病（t2DM）发展和牙槽骨体积显着地变化（P <0.05）的，而其他CC系显示t2DM发展，不考虑牙周炎。白介素-6与牙槽骨变化显着相关（P <0.05），而平均值与曲线下IPGTT面积呈负相关（P <0.05）。
本研究结果表明CC小鼠用于研究t2DM合并骨吸收的遗传背景影响。（文章详见--研究高脂饮食后小鼠牙槽骨变化和糖耐量受损的交叉作用）
【2】糖化胶原刺激牙龈成纤维细胞的分化
葡萄糖衍生的代谢物可能改变牙周膜中重要蛋白质的结构和生物学特性，如胶原蛋白。因此，胶原结合细胞可能改变其表型性状。虽然在牙周病变中可以检测到葡萄糖衍生物甲基乙二醛（MGO），胶质糖化对牙龈结缔组织生物学的精确影响尚未完全了解。本研究评估了MGO胶原糖化是否可能影响人类牙龈成纤维细胞（HGFs）的表型性质和重构能力。
研究用MGO处理的I型胶原基质上原代培养HGFs。测试细胞培养物的细胞活力，凋亡，α-平滑肌肌动蛋白（SMA），纤连蛋白（FN）产生和胶原重塑。使用流变仪和原子力显微镜评估了MGO处理的胶原凝胶的机械性能和形态。使用Kruskal-Wallis和Mann-Whitney U检验进行统计分析。
结果显示，MGO处理胶原不影响细胞活力或细胞凋亡。此外，MGO在诱导胶原基质的形态或机械性质方面没有显着地变化。然而，MGO处理的胶原蛋白刺激肌成纤维细胞标志物α-SMA的增加，FN的产生和形成以及胶原基质的收缩。此外，使用由MGO处理的胶原重组重组胶原结合结构域整合素GFOGER还原的三重螺旋肽诱导FN的形成。
本研究显示，胶原糖化通过MGO刺激肌成纤维细胞的分化和FN的产生和形成。这些反应可能改变受糖尿病或衰老影响的牙龈结缔组织的稳态平衡和伤口愈合反应。（文章详见--糖化胶原刺激牙龈成纤维细胞的分化）
【3】rs2228570位点单核苷酸通过维生素D受体对人牙龈成纤维细胞和牙周韧带细胞转录激活的影响
rs2228570是维生素D受体（VDR）唯一已知的可改变蛋白质结构单核苷酸多态性。可以使用限制性内切核酸酶FokI区分VDR，并因此分为三种基因型：FF，Ff和ff。在本研究中研究了rs2228570对VDRs在人牙龈成纤维细胞（hGFs）和牙周韧带细胞（hPDLC）中的转录激活的影响。
研究从15个供体中，培养hGF和hPDLC，提取基因组DNA，并使用聚合酶链反应（PCR） - 限制性片段长度多态性方法测定基因型。用有或没有VDR拮抗剂ZK159222的骨化三醇或成骨诱导刺激细胞。使用实时PCR检测碱性磷酸酶，骨钙素和VDR信使RNA（mRNA）表达。分别用对硝基苯基磷酸盐底物和酶联免疫吸附测定法对碱性磷酸酶和骨钙蛋白表达进行酶活性检测。
结果显示，在15个供体细胞培养物中，FF，ff和Ff基因型分别为5，3和7。在hGFs的三种基因型中，碱性磷酸酶或骨钙素的表达没有显着性差异。然而，在骨化三醇刺激后，FF-hPDLC中的碱性磷酸酶和骨钙素mRNA水平显着高于其他hPDLCs基因型，骨钙蛋白表达也是如此。此外，当包含ZK159222时，该差异消失，当进行成骨诱导时，FF-hPDLCs中的碱性磷酸酶和骨钙素mRNA和蛋白质水平高于其他hPDLC基因型。
这篇研究表明，FF-VDR基因型与hPDLCs中碱性磷酸酶和骨钙素上调最显着。（文章详见-- rs2228570位点单核苷酸通过维生素D受体对人牙龈成纤维细胞和牙周韧带细胞转录激活的影响）
【4】成骨过程中牙周韧带细胞中循环RNA的表达
本研究旨在研究骨形成过程中牙周韧带干细胞（PDLSCs）中循环RNA（circRNA）的不同表达模式。
研究分离PDLSCs并在成骨培养基中培养。在第0天（D0），第3天（D3），第7天（D7）和第14天（D14），从细胞中提取总RNA，并进行RNA测序以检测circRNA，信使RNA（mRNA），和微小RNA（miRNA）。进行实时定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR），以验证circRNAs和miRNAs的表达。进行差异表达分析和基因本体分析。构建了一个circRNA-miRNA-mRNA网络，揭示了circRNAs的潜在调控作用。
研究共检测到12，693个circRNA转录物，并且circRNAs显示了阶段特异性表达。通过qRT-PCR验证了四种已知的circRNA的表达。总共有118个circRNA在D3差异表达，128个circRNA在D7差异表达，139个circRNAs在D14与D0差异表达。差异表达的circRNA的宿主基因富集在细胞质或膜结合的囊泡和细胞外基质中，表明它们在调节细胞外囊泡的生物发生中的潜在作用。此外，由circRNA潜在调节的mRNA在骨形成相关过程较丰富，包括细胞外基质组织，细胞分化和骨形态发生蛋白信号通路。
这篇研究表明，在PDLSCs的成骨分化过程中，cycRNA的表达谱显着改变，为未来关于circRNAs在成骨细胞分化中的作用提供了线索。（文章详见--成骨过程中牙周韧带细胞中循环RNA的表达）
【5】重组人骨形态发生蛋白-2对犬垂直骨增生的影响
对大多数临床医师来说，垂直骨增生（VBA）仍然是不可预测的和具有挑战性的。本研究旨在比较犬类模型中，空间制备钛网下VBA结合或不结合重组人骨形态发生蛋白（rhBMP）-2对硬组织形成的结果。
研究采用11只雄性比格犬进行研究。建立实验性嵴缺损以形成萎缩嵴。 VBA通过使用钛网和同种异体移植物的引导骨再生进行。在实验中，在手术前rhBMP-2 /可吸收胶原海绵与同种异体移植物充分混合，而对照组则用缓冲液。经过4个月的愈合期，狗被安乐死。进行临床和放射学检查以评估嵴尺寸变化。此外，标本用于微计算机断层扫描（micro-CT）评估和组织学分析。
结果显示，11例（45.5％）rhBMP-2治疗部位中有5例发现膜暴露，11例（81.8％）非rhBMP-2治疗部位中有9例发现膜暴露。经历4个月愈合后，rhBMP-2处理部位表现出更高的放射照相骨密度，更好的缺损填充，以及嵴高度明显增加（P <0.05）。实验半衰期在72％的位点上表现出较低的膜暴露率和值得注意的异位骨形成。Micro-CT结果也提示对照组垂直骨增生和骨矿物质密度较低（P> 0.05）。在光学显微镜下，在从rhBMP-2位点获得的样品中发现了主要的层状图案。
由于犬模型的固有局限性和外科手术技术的要求，目前的研究结果表明，与非rhBMP-2位点相比，rhBMP-2在复合移植物中的存在可以增加在钛网上形成异位骨的垂直增益。（文章详见--重组人骨形态发生蛋白-2对犬垂直骨增生的影响）
【6】二十二碳六烯酸治疗对龈下菌斑微生物的影响
口服二十二碳六烯酸（DHA）+阿司匹林治疗已被证明可以减少未治疗的慢性牙周病患者探诊深度和龈沟液（GCF）中的局部炎症介质。然而， DHA +阿司匹林治疗是否影响特定的细菌附着是未知的。因此，本研究的目的是评估DHA与低剂量阿司匹林治疗对牙周炎患者牙周细菌特征的影响。
实验纳入五十五名患有中重度牙周炎的成年人，3个月随机双盲实验，分为试验组和对照组，每日服用2g DHA加81mg阿司匹林或安慰剂胶囊。 46名参与者完成了实验。除了临床测量和GCF取样外，还从所有参与者的四个后部位点收集龈下菌斑样本，并通过棋盘DNA-DNA杂交技术进行分析。将初始和3个月时存在的40个牙周细菌物种进行半定量估计。
结果显示，尽管临床参数有广泛的改善，但两组之间初始和3个月后菌斑中总细菌和个体物种数量没有明显差异（P> 0.1）。 DHA +阿司匹林对牙龈卟啉单胞菌计数的作用与DHA对PD的有效性的14％（95％置信区间：3％至35％）相关。 DHA +阿司匹林对未调整模型或调整的年龄，性别和种族个体菌斑细菌计数无显着影响（P> 0.1）。
该试点随机对照试验表明，DHA +阿司匹林治疗主要通过调节宿主炎症反应来改善牙周炎。龈下菌斑微生物菌群个体物种水平的变化无法检出；然而，一小部分益处似乎来源于DHA +阿司匹林治疗组牙龈卟啉单胞菌水平的变化。牙龈卟啉单胞菌水平的这种变化是否导致生物膜改变与逆转失调需要进一步的纵向和更具体的调查。（文章详见--二十二碳六烯酸治疗对龈下菌斑微生物的影响）
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